مطالعه بیان پروتئین core+1 ویروس هپاتیت C توسط روش میکروسکوپی هم کانون

Authors

  • آرش معمارنژادیان گروه هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران
  • حسن نوربازرگان دانشگاه آزاد اسلامی، واحد لاهیجان، گروه میکروبیولوژی
  • عطیه هاشمی گروه هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران
  • محمدرضا آقاصادقی گروه هپاتیت و ایدز، انستیتو پاستور ایران
  • مهدی آسمار دانشگاه آزاد اسلامی واحد لاهیجان، گروه میکروبیولوژی
Abstract:

سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینF یاcore+1  شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت C (HCV) کد می‌شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به‌نظر می‌رسد در سیکل زندگی و بیماری‌زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن HCV core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان بررسی گردد. مواد و روش‌ها: ابتدا ژن core+1 داخل پلاسمید pIVEX2.3 به‌عنوان یک ناقل پروکاریوتی کلون شد. در ادامه توالی نوکلئوتیدی 6XHis-tag core+1 حاصل از واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز (PCR) در سایت‌های آنزیمی NheI/BamHI داخل وکتور یوکاریوتی pcDNA3.1(+) کلون شد. این پلاسمید به‌وسیله تجزیه آنزیمی و توالی‌یابی مورد تائید قرار گرفت. پس از ساخته شدن رده سلول کبدی Huh7 به وسیله روش الکتروپوریشن و لیپوفکشن ترانسفکت شدند. با ترانسفکشن هم‌زمان پلاسمید pEGFP-N1 و با تکنیک فلوسایتومتری بازده ترانسفکشن مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت بیان و چگونگی استقرار پروتئین core+1 در سلول توسط میکروسکوپ هم‌کانون ارزیابی شد. یافته‌ها: نتایج هضم آنزیمی و تعیین توالی صحت مراحل کلونینگ را نشان داد. آنالیز فلوسایتومتری بازده بالای روش الکتروپوریشن را در مقایسه با لیپوفکشن برای ترانسفکشن سلول‌های Huh7 نشان داد. هم‌چنین بیان پروتئین core+1 در سلول‌های Huh7 با استفاده از آنتی‌بادی anti-His و میکروسکوپ هم‌کانون مورد تائید قرار گرفت. نتیجه گیری: نتایج این پژوهش بیان یوکاریوتی پروتئین core+1 در سلول‌های Huh7 را نشان داد که به این ترتیب می تواند که ابزار مناسبی را برای مطالعه نقش تداخلی پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و برهم‌کنش آن با سایر پروتئین‌ها در اختیار ما قرار دهد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

مطالعه بیان پروتئین core+1 ویروس هپاتیت c توسط روش میکروسکوپی هم کانون

سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینf یاcore+1  شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت c (hcv) کد می شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به نظر می رسد در سیکل زندگی و بیماری زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن hcv core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان بررسی گردد. ...

full text

مطالعه بیان پروتئین core+۱ ویروس هپاتیت c توسط روش میکروسکوپی هم کانون

سابقه و هدف: پروتئین جدیدی تحت عنوان پروتئینf یاcore+1  شناخته شده است که توسط ژنوم ویروس هپاتیت c (hcv) کد می شود. عملکرد این پروتئین هنوز مشخص نشده است، اما به نظر می رسد در سیکل زندگی و بیماری زایی ویروس قش مهمی را داشته باشد. در این مطالعه کلون کردن و بیان ژن hcv core+1 در سیستم یوکاریوتی مورد بررسی قرار گرفت تا نقش این پروتئین در مسیرهای سیگنالینگ سلولی و مقاومت ویروس به درمان بررسی گردد. ...

full text

بررسی اثر پروتئین core ویروس هپاتیت HCV) C) بر روی بیان miR-150

Background : Hepatitis C virus (HCV) is considered as one of the major pathogenic agents of chronic liver diseases. Previous studies have shown that HCV proteins can interaction with gene regulatory networks such as microRNAs. The aim of this study was to investigate the effect of HCV core protein on the expression of miR-150 in a cell culture model. Materials and Methods: Plasmids expressin...

full text

مروری بر روش های تشخیص آزمایشگاهی ویروس هپاتیت C

ویروس هپاتیت سی (HCV)باعث ایجاد بیماری های هپاتیت حاد،سیروز کبدی و هپاتوسلولار کارسینوما می شود.در این مقاله به طور خلاصه به بیماری زایی و بررسی روش های تشخیصی بر پایه تست های سرولوژیکی و تکنیک های مولکولی برای تشخیص و مدیریت عفونت ویروس هپاتیت سی بررسی می شود. پس از خواندن این مقاله باید بتوانید تست های آزمایشگاهی که برای تشخیص و مدیریت ویروس هپاتیت سی استفاده می شود را توصیف کنید و در ت...

full text

بررسی اثر پروتئین ns3 ویروس هپاتیت c بر القای بیان مارکرهای hsp70 و glypican3 هپاتوسلولارکارسینوما

گزارش شده است که پروتئین های core, ns3, ns4b, ns5a ویروس هپاتیت c پتانسیل تومورزایی را در کشت سلولی و سیستم های حیوانی آزمایشگاهی نشان داده اند . پروتئین ns3 نقش کلیدی در چرخه زندگی ویروس دارد و بر فعالیتهای نرمال سلولی نظیر پرولیفراسیون ، مرگ سلول و مسیرهای پیام رسان سلول موثر است . دو پروتئین انتخاب شده در این تحقیق یعنی hsp70 و glypican3 از جمله پروتئین های مهم در مسیرهای سلولی می باشند ...

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 2  issue شماره 4 (پیاپی 5)

pages  217- 226

publication date 2010-01-01

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023